Detalhes do Projeto

Avaliação do Papel de Estógeno e Testosterona na Resposta Imunológica induzida por ácidos lipoteicoicos oriundos de Staphylococcus aureus

Pesquisa

Lucas Miranda Marques

O paradigma da influência hormonal sobre a resposta imunológica estipula que o estrógeno aumenta essa resposta, enquanto que a testosterona suprime. Contudo, há controversias. Objetivo: avaliar o papel do estrógeno e da testosterona na resposta imunológica da sepse induzida por ácidos lipoteicoicos oriundos (ALT) de Staphylococcus aureus. Camundongos fêmeas e machos (BALB/c) serão ovariectomizadas ou orquiectomizados ou submetidos à cirurgia sham. Após duas semanas, os animais serão inoculados intraperitonealmente com ALT ou solução salina estéril (grupo controle). A eutanásia ocorrerá em quatro tempos com intervalos de 12 horas cada. Para cada tempo serão utilizadas dez fêmeas (n=5 Sham/ n=5 OVX) e dez machos (n=5 Sham/ n=5 ORQ). Os controles (n=5 Sham/ n=5 OVX/ n=5 Sham/ n=5 ORQ) serão eutanasiadas no tempo de 48h. Após a eutánasia, amostras de sangue serão coletadas para contagem de leucócitos, dosagem sérica de citocinas por citometria de fluxo; de estradiol e testosterona por ELISA e determinação de células imunes por citometria de fluxo. O útero será destinado para cálculo do índice uterino. O baço será destinado para dosagem das mesmas citocinas por citometria de fluxo, análise histopatológica e imunohistoquímica. Coração, pulmões e rins serão analisados por histopatologia, imuno-histoquímica e será realizado expressão gênica de marcadores inflamatórios. Neutrófilos e monócitos serão selecionados a partir de amostras de sangue de homens e mulheres saudáveis em idade reprodutiva e estimulados com ALT. As células serão tratadas com estradiol ou testoreona e as citocinas produzidas serão dosadas por citometria de fluxo e a expressão gênica de marcadores inflamatórios será determinada por PCR array. Os dados serão analisados utilizando o GraphPad-Prism 5.0.