Detalhes do Projeto

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DA TERAPIA FOTODINÂMICA (aPDT) MEDIADA POR CURCUMINA SOBRE BIOFILMES DE MICRORGANISMOS RESISTENTES E NÃO-RESISTENTES A ANTIMICROBIANOS NA ÁREA DA SAÚDE

Pesquisa

Francine Cristina Silva Rosa

Em 2017 a ONU publicou a primeira lista dos agentes prioritários resistentes a antibióticos que é a maior ameaça para a saúde humana na atualidade. Em 2023 a ONU ressaltou que com o avanço dessa situação até 2050 as superbactérias poderão matar até 10 milhões de pessoas. Assim novos tratamentos vêm sendo testado e dentre os tratamentos a terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) mostra-se uma importante alternativa ao uso dos antimicrobianos convencionais e às formas microbianas resistentes. Essa técnica utiliza-se da irradiação luminosa de laseres e LEDs (Light Emitting Diodes) associada a corantes fotossensibilizantes para promover a morte não tóxica de microrganismos. O objetivo do presente estudo será avaliar a efetividade da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) sobre biofilmes mono e multiespécies utlizando-se a curcumina em diferentes formulações mediada por LED azul 450nm sobre cepas de espécies microbianas resistentes e não-resistentes de interesse na área da saúde. Também será objetivo do estudo avaliar a atividade antibiofilme da técnica através de ferramentas de alta performance em análise estrutural-molecular de biofilmes identificando prováveis mecanismos de ação. Para a realização do estudo serão utilizadas amostras de microrganismos de interesse na área da saúde. Essas amostras serão ativadas e cultivadas em meios de cultura apropriados ao crescimento e serão incluída em poços de placas de células para constituição de Biofilme em discos de resina acrílica. Os biofilmes crescidos em discos serão submetidos aos diferentes tratamentos propostos (L-P-; L-P+; L-Pn+; aPDT1 e aPDT2) utilizando-se curcumina convencional e nanotecnológica mediada por LED 450nm em tempos de exposição diferentes. Após os tratamentos os corpos de prova serão iintroduzidos em tubos contendo solução salina (puro a 10-4) agitados e a solução pura e diluições serão semadas em meios de cultura apropriados a cada microrganismo. Após período de incubação serão contadas as UFC/mL e o Log10 será utilizado para análise estatística dos resultados. Para os blocos de análise que tiveram os pressupostos de normalidade e homogeneidade das variâncias atendidos será utilizado o teste paramétrico ANOVA, com intervalo de confiança de 95% e pós-teste de Bonferroni para estabelecer comparativos entre os grupos. Para os demais grupos de análises será utilizado o teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis, com intervalo de confiança de 95% e pós-teste de Dunn para comparação estatística entre os grupos. Os corpos de prova impregnados de biofilmes serão preparados para análise da Microscopia Confocal e Ramam para observação dos prováveis mecanismos de ação. Os resultados das microscopias serão observados através de imagens e curvas padrão elaboradas pelos programas correlacionados à esses equipamentos.